Alexandre
God Member
     Барнаул

плашек семь восьмых нет
Сообщений: 1783
Пол:
|
Ладно, не нужно оваций, публичный дебют нового переводчика с англиского языка предлагаю считать открытым. Агаровые пластины заливаются стерильным агаровым раствором в стерилизованные стеклянные чашки Петри или в одноразовые чашки Петри. После высыхания, дрожжи могут быть помещены на пластину. Это делается стерильной посевной петлей. Маленькое количество дрожжей помещается на пластину в одном конце и затем размазывается поперек пластины. Если все выполнено должным образом, дрожжи будут размножаться в том месте, куда попала каждая клетка. После роста в течение 3х – 5ти дней, единичная клетка разовьется в маленькую круглую белую кучку клеток на пластине. Эта кучка называется колонией или клоном. Колонии, происходящие из единственных клеток круглы, так как они растут и расширяются от одного центра. Клетки не имеют рук и ног и не могут двигаться по пластине. Таким образом, хорошие отдельные круглые колонии представляют одну клетку оригинальных дрожжей и свободны от бактерий и других контаминантов. Бактерии и прочие загрязнители могут существовать в других областях пластины в зависимости от качества используемых дрожжей. Образование штрихов на пластинах классический способ очистить дрожжи от контаминантов. После чего, единственная колония, берется стерильной петлей, и переноситься на свежую пластину, косой срез или в жидкую среду. Есть множество процедур, используемых для «размазывания» или штриховой разводки. Так называемая секторная техника постоянно используется для производства чистой культуры и изображена на иллюстрации 4. Этот метод подразумевает быстрое движение петлей содержащей дрожжи (как карандашом при письме), по одной четверти пластины (сектору), петля движется назад и вперед. Потом она повторно стерилизуется (на огне, прим. переводчика), охлаждается и используется, чтобы передать небольшое количество засеянного в первый сектор материала в следующий сектор. Снова этот разжиженный материал размазывается назад и вперед в верхней области сектора. Петля еще раз стерилизуется, охлаждается и используется, чтобы переместить еще более разбавленный образец из второго сектора в третий. После размазывания по третьему сектору, делается стерилизация и охлаждение петли, затем растворенный образец из третьего сектора перетаскивается в четвертый и последний сектор. Здесь образец также размазывается назад и вперед и заполняет всю остающуюся незасеянной область пластины. Стерилизация петли между каждым переходом к новому сектору, обеспечит такое растворение, что, в конце концов, на пластине будут изолированы единичные дрожжи. После инкубации при температуре комнаты в течение 3-5 дней, эти единичные клетки разделятся много раз и, наконец, сформируют матовую белую массу культуры на агаровой поверхности. Покрытые полосами пластины инкубируются перевернутыми (агаровой стороной вниз), так как может сформироваться конденсат и капать на пластину, рассеивая колонии. Пластины запечатываются и хранятся в перевернутом состоянии в холодильнике (это уже хранение).
|